método de la rotura química

método de la rotura química

(chemical cleavage method) Biol. Fund. Procedimiento químico para determinar la secuencia nucleotídica del DNA o de sus fragmentos, que consistía en el marcaje con ³²P de cada extremo de la cadena, y la subsiguiente rotura química parcial, específica, del DNA marcado, en las posiciones ocupadas por una de las cuatro posibles bases. De esta forma, se origina una serie de fragmentos radiactivos cuya longitud se extiende desde el marcaje con ³²P a cada una de las posiciones ocupadas por la base particular. El proceso se repite para cada una de las otras tres bases, y las cuatro series de fragmentos radiactivos se separan en calles adyacentes, mediante electroforesis en gel de poliacrilamida, con lo que las mezclas de nucleótidos se separan en orden creciente del número de unidades presentes. Así, la secuencia de bases del fragmento original de DNA puede leerse directamente en la autorradiografía del gel resultante. Su uso ha disminuido en la actualidad en favor del método del didesoxi. Sinón.: método de Maxam y Gilbert. V. método del didesoxi.